Nova pesquisa: cientistas do NIH desenvolvem teste Covid-19 mais rápido do que RT-PCR
O método é o resultado de uma colaboração entre pesquisadores do Instituto Nacional dos Olhos dos Estados Unidos (NEI), do NIH Clinical Center (CC) e do Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica e Craniofacial (NIDCR).
Os pesquisadores usaram um agente feito pela empresa de suprimentos de laboratório Bio-Rad, denominado 'resina Chelex 100' para preservar o RNA SARS-CoV-2 em amostras para detecção por RT-qPCR. (Foto do arquivo) Cientistas do Instituto Nacional de Saúde dos Estados Unidos (NIH) desenvolveram um novo método de preparação de amostras para detectar SARS-CoV-2. O método ignora a extração do material de RNA genético do vírus, potencialmente reduzindo o tempo e o custo do teste.
O método é o resultado de uma colaboração entre pesquisadores do Instituto Nacional dos Olhos dos Estados Unidos (NEI), do NIH Clinical Center (CC) e do Instituto Nacional de Pesquisa Odontológica e Craniofacial (NIDCR).
Os testes padrão envolvem a amplificação do RNA viral para níveis detectáveis usando uma técnica chamada RT-qPCR. Mas, primeiro, o RNA deve ser extraído da amostra. Os fabricantes de kits de extração de RNA tiveram dificuldade em acompanhar a demanda durante a pandemia.
Os pesquisadores usaram um agente feito pela empresa de suprimentos de laboratório Bio-Rad, denominado 'resina Chelex 100' para preservar o RNA SARS-CoV-2 em amostras para detecção por RT-qPCR.
Usamos amostras de nasofaringe e saliva com várias concentrações de vírions para avaliar se elas poderiam ser usadas para detecção direta de RNA. A resposta foi sim, com sensibilidade notavelmente alta. Além disso, esta preparação inativou o vírus, tornando mais seguro para o pessoal de laboratório lidar com amostras positivas, disse o autor principal do NIH, Bin Guan, do Instituto Nacional de Olhos dos Estados Unidos. O artigo foi publicado na iScience.
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A equipe fez sua descoberta testando uma variedade de produtos químicos usando amostras sintéticas e humanas para identificar aqueles que poderiam preservar o RNA em amostras com degradação mínima, permitindo a detecção direta do vírus por RT-qPCR.
Para validar o teste, eles coletaram amostras de pacientes e as armazenaram em meio de transporte viral ou no recém-desenvolvido tampão de resina quelante no NIH Symptomatic Testing Facility.
As amostras em meio de transporte viral foram testadas pela equipe de testes Covid-19 no Centro Clínico do NIH, usando extração de RNA convencional e teste RT-qPCR. As amostras em tampão de resina quelante foram aquecidas e o RNA viral, então, testado por RT-qPCR. A nova preparação aumentou significativamente o rendimento de RNA disponível para teste, em comparação com o método padrão.
- Fonte: NIH (EUA)
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